轉自：藥事縱橫
摘要：藥物分析過程中含量分析方法越多的采用色譜技術，色譜技術靈敏度高，用量少，可以很完美的完成分析任務，而涉及到一些藥物，沒有紫外吸收，蒸發光檢測器，CAD檢測器等重復性不好的情況下，我們的分析方法的目光則會定位到滴定上，無論是酸堿滴定，沉淀滴定，還是絡合滴定，都給予了藥物分析很大的選擇空間，今天，我和大家來聊聊非水滴定中的那些事，目前工作兩年，從一只藥物分析小白成長過程中的一些心得和體驗，若要不足，敬請諒解。
原理及應用范圍
我們常說的非水酸堿滴定適用于什么樣藥物呢，需要根據藥物結構來進行判定，若我們的藥物是一元強酸強堿，在水溶液中進行酸堿滴定，滴定準確度高；但通常我們所做的藥物分子有以下幾個特點：
水溶性差，多數藥物在水中均不溶；弱酸弱堿，在水中的離解常數小于10-7，在水中突越不明顯；
多元酸堿，分步解離常數接近，難以判斷終點；
滴定終點難以判斷，不知道如何選用指示劑。
非水酸堿滴定正好可以彌補這些缺點，提高溶液的溶解性，提高樣品的相對酸度和堿度，增加突越范圍。
適用范圍：非水滴定可以用于酸堿滴定，氧化還原滴定，配位滴定和沉淀滴定，本次我們主要討論非水溶液中的酸堿滴定。下面就非水滴定中的一些參數進行討論；
滴定終點判斷-電極的選擇
方法1：目前我們判斷滴定終點，在傳統意義上運用指示劑的變色來判定，選用的依據是根據滴定終點的PH?來選擇在此區間變色的指示劑。但是這種傳統而古老的方法精確度不夠，可能會測定的含量準確度和精密度不夠，人為誤差較大。
方法2：電位法指示終點，目前梅特勒公司所推出的DGi113和DGi116復合電極用于非水滴定的指示終點的測定。電位法越來越多的用于指示滴定終點，因為用電極測定靈敏度高，準確度高，而現在的復合電極易于操作，越來越受到分析工作者的青睞。
電極注意事項：此類電極的電解液是1mol/L的氯化鋰乙醇溶液，電極的里面不應有氣泡，由于氯化鋰的溶解性不太好，所以，自己添加電解液時應以防有氯化鋰析出，若有析出，應及時將固體洗出，先用純水洗出，再用乙醇清洗，最后添加電解液進去；將電極活化半天后取回再用。
溶劑的選擇
質子溶劑：
弱堿類藥物滴定：對于弱堿類藥物，由于堿性較弱，因此對于溶劑的選擇，我們會首選給出質子較強溶劑，通常情況下為弱酸，例如醋酸，丙酸等；藥物在溶劑中酸堿性的強弱，不僅和藥物本身的孤對電子數目有關，也和他的溶劑（空軌道數）有關系，所以同樣的弱堿樣品在水中和在醋酸中的堿性會有很大區別。
弱酸類藥物的滴定：弱酸類樣品首選溶劑是弱堿性溶劑，接受質子較強的溶劑，來提高弱酸的相對酸性，這類常用溶劑有：二甲基甲酰胺，乙二胺，乙醇胺等。
不太弱的酸堿：這類首選兩性溶劑，即可以給出質子，又可以接受質子，這一類溶劑和水相似，例如醇類。
非質子溶劑：
以上三類統稱為質子性溶劑，在酸堿滴定中，有質子的轉移，另一類溶劑是無質子溶劑，這一類溶劑不單純作為溶劑使用，而是和質子容易連用，起到畫龍點睛的作用，此類溶劑根據有無作用力非為兩類：
偶極親質子溶劑：此類溶劑本身無質子轉移，但是由于偶極作用力具有接受質子的傾向，和本身的略堿性，具有形成氫鍵的能力，此類溶劑含N，O，F等元素，適用于作為滴定弱酸及混合物的介質。例如：酰胺類，酮類，腈類。
惰性溶劑：此類溶劑在非水滴定中，不能單為溶劑，但是可以和以上三類的質子溶劑混合使用，對于滴定過程中可以起到增加溶解性的作用，增大滴定突越，提高準確度。這類溶解有苯，三氯甲烷，二氯甲烷，和二氧六環。
每個做藥物分析的工作人員均可以根據樣品的特性來選擇合適的溶劑，或者混合溶劑。
滴定液的選擇
堿性物質滴定：高氯酸滴定液，鹽酸滴定液等
酸性物質滴定：氫氧化鈉滴定液，甲醇鈉等。
常見問題討論
1，電位滴定儀首次參數應該怎么設置
目前市場上的電位滴定儀以梅特勒家的儀器為主，對于我們初次進行滴定的方法摸索的時候，肯定希望用一個合理的方法，我建議大家首次滴定，一切未知的情況下，在滴定液的控制選擇增量添加模式，以每滴0.05ml的體積，平衡接受模式選用，固定時間模式每4s或者5s加一滴，或者也可以選用儀器自帶的慢速滴定模式；預饋液的體積建議為0，等到方法參數定下來再改進預饋液的體積。
2，樣品的質量怎么定
滴定過程中，10ml的滴定臺通常建議滴定劑的消耗體積為滴定管的70%-90%之間，這樣的體系比較穩定，若是位于之外的話，容易準確度降低。
3，滴定曲線不光滑怎么辦
判斷曲線是整條曲線都不光滑還是在曲線上升段不光滑
首先，若是整條曲線不光滑，先看一下是不是電極底部有氣泡，或者未溶解的顆粒，氣泡和鹽的析出會影響整個曲線的光滑度。
其次，若是突越期間不光滑，那樣品是不是有沉淀產生，附著在電極上，影響了終點的判斷，導致突越處檢測的電位不夠靈敏。
4，樣品溶解性能不好怎么辦
在我們初步的選用了相對酸堿度較好的溶劑的情況下，發現樣品的溶解性不好，我們可以選用一些溶解樣品的惰性溶劑添加進去，來增加溶解度，改善突越曲線；若是我們選用了高氯酸作為滴定劑，也可以加入一些稍弱的酸來增加溶解度，例如，鹽酸，甲酸等。
5，加入酸酐的量怎么確定
很多的分析工作者，會在非水滴定中加入酸酐來去除反應體系中水的影響，若是我們的化合物中有芳香伯胺或者烷基伯胺，在滴定反應中，易和酸酐發生乙酰化反應，使得滴定的數據發生偏差，導致測定的含量降低；對于工藝成熟的樣品，加入酸酐的量應根據化合物的水分計算得出。若工藝不穩定的樣品，可以不考慮加入酸酐。
6，高氯酸滴定還是滴定突越不明顯怎么辦
若是方法開發中，高氯酸-醋酸體系已經試過了各種方法，那可能是這個滴定體系不適用于我們的樣品，那么我們可以換一個滴定體系，鹽酸作為滴定液，滴定體系可以選用甲醇，乙醇，異丙醇等。
最后希望我有限經驗可以幫到大家解決一些問題。